抗华支睾吸虫循环抗原Fab抗体克隆的筛选及序列分析

目的获得抗华支睾吸虫循环抗原Fab段抗体.方法将华支睾吸虫代谢抗原包被在固相ELISA板中,采用"吸附-洗脱-扩增"的方法,对已构建的抗华支睾吸虫噬菌体抗体库进行富集.从富集后的抗体库中筛选抗循环抗原抗体克隆,并交叉筛选鉴定其特异性.结果从206个克隆中筛选到阳性克隆23个,再分别用肺吸虫、肝片虫、姜片虫和日本血吸虫脱脂全虫粗抗原进一步交叉筛选,最终获得特异性抗Cs-MAg阳性克隆3个(B05,C10和E38).对其中2株(E38和B05)序列分析表明它们的κ轻链V基因属于人VκⅠ(O2)亚群,J基因属于Jκ1;γ链V基因属于人VHⅠ-69亚群,D基因来自D3-10,J基因则来自JH3.结论用成虫代谢抗原直接包板,可以从抗体库中筛选到阳性克隆,构建的噬菌体抗体库是成功有效的.