环氧丙烷皂化废水活性污泥DNA提取方法的比较与优化

探索适宜的环氧丙烷废水中活性污泥微生物总DNA提取的方法并进行优化。采用11种方法提取环氧丙烷废水中活性污泥微生物总DNA，即NaCl溶液提取缓冲液溶菌酶十二烷基磺酸钠（ SDS）法、蛋白酶K SDS法、SDS 反复冻融法、Tris EDTA NaCl 聚乙烯吡咯烷酮（PVP）（TENP）法和反复冻融 SDS 蛋白酶K法等。通过对这11种方法进行比较，以确定最佳试验方案并结合单因素法对最佳方案进行优化。琼脂糖凝胶电泳结果显示：NaCl溶液提取缓冲液溶菌酶 SDS法提取DNA亮度高，有大片断DNA的存在且拖带较少，条带集中；酶法所提取的DNA效果仅次于提取缓冲液溶菌酶 SDS法，其他方案没有提取出DNA。单因子试验结果表明：10 mg／mL溶菌酶，100 g／LSDS，反应时间为30 min，反应温度为45℃时效果最佳。 NaCl溶液提取缓冲液溶菌酶 SDS提取法为环氧丙烷废水中微生物群落在分子水平上的研究提供了一种简便、可靠的DNA提取方法。