重组人瘦素对慢性特发性血小板减少性紫癜患者骨髓巨核细胞的影响
Journal of Taishan Medical College(2014)
Abstract
目的:探讨瘦素对 CITP 骨髓巨核细胞的影响。方法以急性巨核细胞白血病细胞株 M07e 和 CITP 骨髓 CD34+细胞经诱导分化的巨核细胞为研究对象。运用 RT-PCR 检测 M07e 细胞瘦素受体 mRNA 表达,运用 Brdu-ELISA 法检测瘦素对 M07e 细胞的增殖作用,运用 Annexin V/ PI 双标流式检测瘦素对 M07e 细胞的凋亡作用。经TPO、SCF 诱导磁珠分选后获得的 CITP 骨髓 CD34+细胞分化为巨核细胞,运用流式测定瘦素对其分化过程中CD41a +、CD61+的表达以及 CD41a +细胞的凋亡是否有影响。结果瘦素受体长型 Ob-RL 和短型 Ob-RS 在 M07e细胞均有 mRNA 表达。瘦素对 M07e 细胞的增殖有促进作用,并呈现一定的剂量依赖性,浓度为5 ng/ ml 即显示出促增殖效应(P =0.037),但浓度在5、10、25 ng/ ml 之间无明显统计学差异,浓度为100 ng/ ml 时其增殖效应最大。在时间依赖效应上,瘦素作用48 h,其细胞增殖明显高于24 h,而作用72 h 其细胞增殖介于两者之间(P =0.000)。瘦素对 M07e 细胞具有抑制凋亡作用(P =0.001),而且在作用72小时后凋亡率最高。瘦素对骨髓 CD34+细胞分化为巨核细胞过程中 CD41a +、CD61+表达的影响,与不加瘦素组相比无明显统计学差异(P >0.05)。对 CD41a +细胞凋亡的影响与不加瘦素组相比亦无明显统计学差异(P >0.05)。结论瘦素通过促进 M07e 细胞的增殖,抑制其凋亡来参与巨核细胞白血病的发生、发展。瘦素在 TPO + SCF 诱导 CITP 骨髓巨核细胞分化中无明显协同作用,对分化产生 CD41a +巨核细胞的凋亡亦无明显作用。
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Key words
recombinant human leptin,idiopathic thrombocytopenic purpura,megakaryocyte
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