大鼠脂肪干细胞分离培养及细胞表型的研究

目的：分离、培养和冻存大鼠脂肪干细胞，并对其相关的细胞表型进行研究，为利用脂肪干细胞治疗梗阻性肾病肾纤维化等实验提供依据。方法取大鼠3只，经消毒麻醉，采集其腹股沟处脂肪组织分离培养其中的脂肪干细胞，用相差倒置显微镜观察细胞生长方式及形态变化。取第三代细胞用流式细胞仪作细胞免疫表型的鉴定。冻存复苏后再次检测干细胞生长情况及表型。结果大鼠脂肪组织中含有大量间充质干细胞，原代培养的ASCs呈小圆形或星形，经传代后的脂肪干细胞形态比较均一，呈长梭形，个别略呈多角形、漩涡样生长。其细胞表型为CD29、CD44高表达，CD73、CD105中等程度表达，CD34极低表达。脂肪干细胞经低温冻存3个月，复苏后，生长活力和存活率与冻存前未见明显区别，CD44和CD29检测与冻存前表达率也一致。结论建立了一种脂肪干细胞的有效分离、培养及保存方法，并对其表面标志物进行鉴定，为利用脂肪干细胞进行进一步的实验研究提供了依据。