甲状腺激素反应蛋白1的原核生物表达
Chinese Journal of Endocrinology and Metabolism（2003）
Abstract
目的应用基因工程技术表达甲状腺激素反应蛋白1(TRP-1).方法应用RT-PCR方法,从新生大鼠脑组织RNA中扩增编码TRP-1的cDNA片段,构建表达型重组质粒,经DNA序列分析确证后,在大肠杆菌中表达,以Western印迹来初步鉴定是否表达了目的融合蛋白,用亲和层析纯化融合目的蛋白,并以SDS-PAGE电泳测定其相对分子质量.结果所获特异PCR产物正确地重组入Pinpoint Xa-1表达载体中.Western印迹表明经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核细胞表达产生了目的融合蛋白,亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约23 400的融合目的蛋白.结论应用原核细胞表达体系成功地表达了TRP-1融合蛋白,为进一步研究其在脑发育中的所起的作用以及该蛋白的其它功能提供了可能.
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prokaryotic expression,thyroid,gene,hormone-response
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