绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用

根据绵羊肺炎支原体hsp70基因和多杀性巴氏杆菌sp6基因分别设计引物,建立了绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,优化条件后进行特异性和敏感性评价,并对160份临床样本进行了检测.结果显示,绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌引物的最佳终浓度分别为30 pmol/L和10pmol/L.该方法的特异性较好,对其他无关病原不检出.对绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的检测下限分别为4.4pg和22 pg,与独立PCR的敏感性相同.临床样本的检测结果显示,该方法对绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的检出率分别为50.6％和47.5％.结果表明,本研究建立的双重PCR方法具有特异性好、敏感性高等特点,为临床上绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌混合感染的快速检测、鉴定以及流行病学调查提供了有用的工具.