鸡传染性支气管炎病毒S1基因抗原区的原核表达及鉴定
China Animal Husbandry & Veterinary Medicine(2014)
Abstract
本研究以鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV) S1基因为研究对象,设计特异性引物扩增S1抗原集中区目的基因,长度为198 bp,亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,构建重组原核表达质粒pGEX-6P-1-S1,转化至宿主菌Rosetta(DE3)后进行诱导表达.SDS-PAGE分析结果显示,表达获得1条特异性蛋白条带,其分子质量大小为33.0 ku,与预期蛋白大小一致.可溶性分析结果表明目的蛋白以包涵体形式存在.Western blotting结果显示,重组蛋白能与IBV鸡阳性高免血清反应,被GST标签单抗识别,结果表明该融合蛋白正确表达并具有良好的抗原性.本研究为制备IBV单克隆抗体奠定了抗原基础.
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Key words
identification,prokaryotic expression,S1 protein,avian infectious bronchitis virus
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