叶酸缺乏对鼠胚成纤维细胞MAPK通路及多潜能干细胞诱导效率的影响

目的:观察短暂性的叶酸缺乏对鼠胚成纤维细胞(MEF) MAPK通路及其诱导多潜能干(iPS)细胞诱导效率的影响.方法:将鼠胚成纤维细胞分为正常叶酸组、叶酸缺乏3d组和叶酸缺乏6d组,分别于叶酸缺乏3、6d western blot法检测提取的上述3组鼠胚成纤维细胞中的磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白和总细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白的变化,用经典四因子的逆转录病毒载体进行感染,并对获得iPS细胞进行鉴定.结果:叶酸缺乏3d组p-ERK明显降低,感染后第12天出现具有胚胎干细胞形态的克隆,叶酸缺乏3d组、6d组产生的iPS细胞和正常叶酸组的诱导效率分别为(0.0477±0.0005)％、(0.0155 ±0.0019)％和(0.01 ±0.0005)％,所获的iPS细胞多能性基因和免疫荧光多能性标志鉴定为阳性.结论:叶酸缺乏3d能明显压低p-ERK的表达,提高小鼠iPS细胞的诱导效率,且诱导的细胞多能性基因和免疫荧光多能性标志鉴定为阳性.