人乳头瘤病毒16型E7密码子优化后的原核表达及免疫原性研究

目的 构建人乳头瘤病毒16型(HPV16) E7基因密码子优化后的原核表达系统,通过特异性抗体制备评价E7融合蛋白的免疫原性.方法 人工合成优化后的HPV16 E7基因,利用特异引物扩增HPV16 E7基因.将E7基因连接至原核表达载体构建重组表达质粒pMAl-c2X-E7,转化至感受态细胞DE3后,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表达产物E7融合蛋白.纯化后的E7融合蛋白免疫动物,采用ELISA检测动物血清效价.结果 E7基因PCR产物的测序结果与优化后的目的基因序列比对一致.表达的E7融合蛋白经SDS-PAGE分析表明:在相对分子质量50 000处有特异性表达带,与预期相符.以E7融合蛋白制备的多克隆抗体其血清效价可达1∶64 000.结论 成功构建的重组表达质粒pMAl-c2X-E7可有效表达MBP-E7融合蛋白,E7融合蛋白具有良好的免疫原性.