抗2,4-D巨大芽孢杆菌基因组文库的构建

Si-liang XU, Chao HAN,Long-guo JIN,Li-juan QIU,Bo TAO

Soybean Science（2014）

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摘要

以抗2,4-D的巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium为材料,酶切基因组总DNA和载体pACYC184;回收1～4 kb范围的外源基因组DNA片段,与载体连接后,转入BL21感受态细胞中,进行蓝白斑与氯霉素抗性筛选,采用菌落PCR方法检测连接效率,并对该文库进行质量鉴定.成功构建了巨大芽孢杆菌基因组文库,得到8 900个阳性重组子,平均插入片段长度为2.5 kb,文库约覆盖了B.megaterium菌株基因组的556倍.该文库的建立为选育抗2,4-D转基因大豆的新品种奠定了基础.

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关键词

bacillus megaterium,genomic library construction

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