应用iTRAQ技术构建胃癌唾液的蛋白质组差异表达谱

目的:应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术标记定量蛋白组技术对胃癌患者唾液的全组蛋白进行鉴定和定量分析,初步获得胃癌患者唾液的蛋白组差异表达图谱.方法:胃癌患者与正常人唾液各10例,各组等量混合后利用iTRAQ 8标试剂标记后的样本,采用Nano-LC-Ms/Ms分离、分析肽段,运用Proteinpilot 4.0软件对蛋白进行鉴定和定量分析,并比较这些蛋白的表达差异.结果:对样品进行了2次Nano-LC-Ms/Ms,标记率＞95％,错误发现率＜1％,鉴定出符合假阳性率＜1％,共鉴定了747个蛋白.与正常对照组相比,胃癌组共出现了2倍以上表达差异的蛋白质21个,其中上调的12个,下调的9个.结论:iTRAQ联合Nano LC-MS/MS技术能高通量地筛选胃癌患者唾液中相关的蛋白,为胃癌患者早期诊断和预后提供可能的生物学标志物或治疗靶点,建立一种无创、简便、快捷实用的检测评估手段.