大肠杆菌耐热元器件的构建及其应用

以提高大肠杆菌耐热性为目的，基于腾冲嗜热菌（Thermoanaerobacter tengcongensis MB4）热激蛋白基因T.te-HSP20构建了诱导型耐热元器件 T7-T.te-HSP20和组成型耐热元器件 gapA-T.te-HSP20，转入大肠杆菌（Escherichia coli）获得工程菌 E. coli-TH 和 E. coli-GH。工程菌E. coli-TH在30℃和IPTG诱导下，目标蛋白呈可溶性表达，经50℃热激30 min后，存活率提高了3.2倍。高温发酵表明gapA-T.te-HSP20扩宽了工程菌E. coli-GH的最适生长温度的范围（37～43℃），较大程度提高了大肠杆菌的耐热性。抗逆性分析还发现工程菌E. coli-GH具备了耐热与耐丁醇的双重功能，并有一定的抗乙酸和乙醇能力。为工业梯度升温发酵生产生物基产品的高效制造、节省成本提供了新思路。