三种基因导入系统对视网膜色素上皮细胞转染效率的研究

目的:以增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)为报告基因,研究lipofectamine 2000、FuGENE6和逆转录病毒载体介导的基因导入系统对视网膜色素上皮细胞的基因转染效率,为视网膜及视网膜相关疾病的基因治疗奠定基础.方法:在体外分离培养人视网膜色素上皮细胞,构建含有EGFP基因的表达载体,分别应用阳离子脂质体lipofectamine 2000、FuGENE6和逆转录病毒三种方法将EGFP基因转染到人视网膜色素上皮细胞中,转染后于48 h在荧光显微镜下观察EGFP的表达情况.结果:三种方法介导EGFP基因在人视网膜色素上皮细胞中表达的阳性比例平均分别为52%、10%和72%.结论:在体外可通过逆转录病毒系统或阳离子脂质体lipofectamine 2000有效地将外源基因导入到人视网膜色素上皮细胞中,其中以逆转录病毒系统转染效率为最高.