嗜水气单胞菌与温和气单胞菌的LAMP检测方法的建立
South China Fisheries Science(2014)
Abstract
利用环介导等温扩增技术( loop-mediated isothermal amplification,LAMP)分别建立嗜水气单胞菌( Aeromonas hydrophila,AH)与温和气单胞菌( A. sobria,AS)的快速检测方法。针对嗜水气单胞菌pilin基因、温和气单胞菌zipA基因设计特异性LAMP引物。在恒温条件下利用实时浊度仪对2组引物进行特异性和灵敏度试验,并以琼脂糖凝胶电泳和核酸染料颜色变化对扩增结果进行判定。结果显示,LAMP实时浊度法能够特异地检测嗜水气单胞菌和温和气单胞菌,最低检出限分别为46 fg·mL-1和320 fg·mL-1,是普通PCR方法的104倍和102倍;并能应用于已知临床样品检测。该研究建立的嗜水气单胞菌与温和气单胞菌LAMP快速检测方法具有高效、特异、灵敏的特点。
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Key words
aeromonas hydrophila,isothermal amplification,loop-mediated
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