TaqMan(R) RT-PCR对水疱性口炎病毒的鉴定检测

水疱性口炎分为印第安那型(Indiana)和新泽西型(New Jersey).这两种血清型病毒的快速和可靠的鉴别对该病的诊断、检疫、分子流行病学调查和监测至关重要.文章按照VSV核蛋白基因序列,设计了一对两型通用引物和两型各自特异性探针.研究建立了VSV实时荧光定量PCR检测方法,对VSV细胞培养物、人工感染实验动物组织、血清样品,以及系列稀释的不同TCID50样品、其它相关或相似病毒进行鉴定,同时与常规PCR、病毒分离试验作了比较.TaqMan(R) RT-PCR的特异性和敏感性相当于或优于对照方法.重复性和稳定性试验证实,该方法可靠.每个试验中设立阳性、阴性对照和标准稀释度对照,使试验结果可对病毒RNA作准确定量,并可在4 h内获得结果.研究结果表明,TaqMan(R) RT-PCR方法是一种特异性强、敏感性高、快速安全的定量检测方法.因此,可以作为VSV的快速检测和定型.