结核分枝杆菌Rv0440 CTL表位肽的免疫原性研究

目的 体外鉴定结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv0440蛋白序列中表位肽362 370 aa和369-377 aa的HLA A*0201限制性CD8+ CTL表位的免疫原性,为基于表位的结核疫苗研究提供实验依据.方法 根据T2细胞HLA-A* 0201分子与多肽结合力分析实验结果,选取结核分枝杆菌Rv0440蛋白质氨基酸序列中对HLA-A* 0201分子高亲合力的Rv0440 1(362-370 aa,KLQERLAKL)和Rv0440-2(369 377 aa,KLAGGVAVI)作为候选表位肽.用候选表位肽刺激PPD(+++)健康志愿者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)检测细胞分泌IFN γ的水平.用候选表位肽诱导特异性CTL细胞,检测特异性CTL细胞对负载表位肽的T2细胞的杀伤活性,观察Rv0440-1和Rv0440 2的HLA-A* 0201限制性CD8+ CTL表位的免疫原性.结果 ELISPOT实验结果显示,表位肽Rv0440-1能够明显诱导HLA-A* 0201(+)、PPD(+++)健康志愿者PBMC分泌IFN γ(P＜0.05);且表位肽Rv0440-1负载DC诱导的CTL在效靶比为10:1时对负载相应表位肽的T2细胞的特异性杀伤活性高于对照组(P＜0.05);与对照组相比,表位肽Rv0440 2没有诱导能力.结论 表位肽Rv0440-1(362-370 aa,KLQERLAKL)具有良好的免疫原性,是有效的结核分枝杆菌的HLA-A*0201限制性CTL表位.