结核分枝杆菌rrs和rpsl基因突变与二线氨基糖苷类耐药关系分析

目的：了解耐二线氨基糖苷类结核分枝杆菌临床分离株rrs与rpsl基因突变特征及其与耐药的关系。方法对136株活动性肺结核患者痰标本分离的结核分枝杆菌进行菌型鉴定及结核分枝杆菌药敏试验，提取耐二线氨基糖苷类结核分枝杆菌DNA，应用PCR扩增rrs和rpsl目的片段，并进行测序、比对验证。结果从136株临床结核分枝杆菌中筛选出耐二线氨基糖苷类菌株25株（18.3%，25/136），其中耐卷曲霉素13株（9.56%，13/136）、耐卡那霉素9株（6.62%，9/136）、耐卷曲霉素和卡那霉素2株（1.47%，2/136）、耐卷曲霉素、卡那霉素、阿米卡星1株（0.73%，1/136）。经测序分析，25株均存在rrs和（或） rpsl基因突变（100%，25/25），其中双基因联合突变3株，共计两种类型：rrs A1401G和rpsl AAG43AGG、AAA121AAG （2株）；rrs A1401G和rpsl AAG88AGG、AAA121AAG（1株）；rpsl单基因双突变3株，共计两种类型：rpsl AAG43AGG、AAA121AAG（2株）；rpsl GGT11GTT、AAA121AAG（1株），rpsl 基因的GGT11GTT突变尚未见相关文献报道，为新的突变位点；余19株为单基因单突变rpsl AAA121AAG。结论结核分枝杆菌对二线氨基糖苷类耐药与rrs和rpsl基因突变有关，rrs A1401G与rpsl基因GGT11GTT突变为进一步研究耐药机制以及耐药结核病的快速检测提供了依据。