引起猪腹泻的病毒分离鉴定

为了对近年来引起仔猪腹泻的主要病毒进行分离鉴定，进而为疫苗的研发奠定基础，自2011年开始，从华南地区猪场连续3年检测出多个引起猪腹泻症状的病毒。其中2011年采用 MA-104细胞系从临床样品小肠内容物中分离到猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪轮状病毒 A（PRoVA），临床样品为2种病毒的混合感染。2012年分离到 PEDV、PRoVA 和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）3种病毒，临床样品为3种病毒混合感染。2013年从临床样品中只分离到 PEDV 1种病毒。通过在 Vero-76传代细胞系中前3代加入胰酶和猪胰酶，自第4代仅加入胰酶的方法，成功克服了 PEDV 的细胞毒性，实现了连续传代，并在第8代出现了细胞病变（CPE）。通过采用 IgY 抗体对 PEDV 和 PRoVA 混合感染的 MA-104细胞培养液连续中和和传代，成功分离纯化到猪轮状病毒 A。对9个猪场的3年猪腹泻病毒性疾病流行病学调查表明，2011年-2013年主要是以 PED 流行为主。