肝脏型脂肪酸结合蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备和鉴定

目的：制备抗肝脏型脂肪酸结合蛋白(LFABP)的单克隆抗体(mAb)并进行亚型和特异性鉴定。方法：以重组的LFABP蛋白为免疫原，经过原核表达和纯化后，免疫BALB/c小鼠，获得分泌鼠抗人LFABP蛋白mAb的杂交瘤细胞株，通过ELISA和Western blot方法检测其特异性。结果：纯化的LFABP重组蛋白免疫小鼠后经过筛选得到2株稳定分泌抗人LFABP的mAb杂交瘤细胞株，分别命名为3E6和5B7，其亚型分别为IgG1和IgG2a，抗体经纯化后浓度达到2 mg/mL，效价达到1∶10000以上。Western blot分析结果表明可与细胞中表达的内源LFABP发生特异性免疫反应。结论：成功制备了鼠抗人LFABP的mAb，为进一步研究LFABP的生物学特性，并为相关疾病的治疗奠定了基础。