赭曲霉毒素A模拟抗原表位及噬菌体展示酶联免疫吸附分析法的建立

以驴抗鼠二抗包被微孔板,以捕获方式包被抗赭曲霉毒素A(OTA)单克隆抗体,利用噬菌体随机七肽库筛选OTA模拟抗原表位,并以其替代检测抗原,建立了基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析(Phage ELISA)检测OTA的方法.结果表明,筛选获得的模拟OTA抗原表位七肽氨基酸序列为GMSWMMA.基于模拟表位噬菌体建立的Phage ELISA方法半数抑制浓度(IC50值)为(0.15±0.02) ng/mL,检测OTA的线性范围为0.03～ 0.50 ng/mL,OTA的检出限为0.03 ng/mL,且Phage ELISA与其它4种常见真菌毒素(黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇及玉米赤霉烯酮)无交叉反应.大米样品OTA加标实验表明,批内加标回收率为97.0％ ～ 115.2％,批间加标回收率为107.2％ ～ 123.1％,与ELISA试剂盒检测结果比较,无显著性差异.