高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中硫辛酸

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中硫辛酸浓度,并对口服0.2g硫辛酸分散片后的药代动力学进行研究.方法:血浆样品以萘普生为内标,经乙腈沉淀蛋白后进行LC-MS/MS分析.采用高效液相分离系统,色谱柱为Venuseil XPB C18柱(150mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-10 mmol·L-1醋酸铵-甲酸(80∶20∶0.2);采用质谱检测系统,ESI离子源,负离子模式,多反应监测(M RM)方式监测m/z 205→m/z 171(硫辛酸)和m/z229→m/z 170(萘普生,内标).结果:建立的LC-MS/MS法在2.500 ～5 000 ng·mL-1质量浓度范围内,硫辛酸色谱响应与质量浓度相关性良好,定量下限为2.500 ng·mL-1;批内及批间精密度RSD均小于7％,准确度在96.5％～101.6％.12名受试者单次服用0.2g硫辛酸分散片后AUC0-t为(1 816 ±885.6)ng·mL-1·h,AUC0-∞为(1 837±879.6)ng·mL-1·h,Cmax为(3 432±2 410) ng·mL-1,tmax为(0.45 ±0.44)h,t1/2为(0.45 ±0.18)h,MRT为(0.73 ±0.31)h,CL为(133.2 ±66.63)L·h-1,Vd为(85.60±50.98)L.结论:本测定方法灵敏准确,适用于人血浆中硫辛酸浓度的测定及其药代动力学研究.