低氧诱导因子-2α基因沉默对骨肉瘤细胞株MG-63生物学行为的影响
Tianjin Medical Journal(2014)
Abstract
目的:探讨低氧诱导因子-2α(HIF-2α)基因沉默对低氧状态下骨肉瘤MG-63细胞的影响。方法Western Blot检测MG-63细胞HIF-2α表达。利用小干扰RNA(siRNA)获得MG-63/siHIF-2α(siHIF-2α)细胞,阴性对照为MG-63/scramble(NC)细胞。Western Blot检测MG-63、NC和siHIF-2α细胞中HIF-2α、血管内皮生长因子(VEGF)、p-Erk/Erk及Mcl-1的表达。低氧下培养NC和siHIF-2α细胞,MTS试剂检测细胞活性,划痕迁移试验检测迁移能力,克隆集落形成试验检测集落形成率,裸鼠皮下移植瘤试验检测体内肿瘤生长情况。结果低氧可诱导MG-63细胞的HIF-2α蛋白表达,并呈时间依赖性(F=2037.412,P<0.001)。低氧下siHIF-2α细胞的HIF-2α表达低于NC细胞(P<0.01)。低氧12 h和24 h,siHIF-2α组细胞活性均低于NC组,相对划痕宽度均大于NC组(P<0.05或P<0.01)。1000~5000细胞种植数的siHIF-2α组的集落形成率均小于NC组(P<0.05或P<0.01)。低氧下siHIF-2α细胞的VEGF、p-Erk/Erk和Mcl-1表达均低于NC细胞(P<0.01)。裸鼠皮下移植瘤siHIF-2α组肿瘤体积、质量和密度均小于NC组(P<0.01)。结论阻断HIF-2α信号通路可作为骨肉瘤临床治疗的新策略。
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osteosarcoma,hypoxia-inducible
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