念珠菌优势抗体检测方法的建立及临床诊断价值评估

目的 侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis, IC)是免疫功能损伤或低下患者常见的感染和死亡原因,近年来检测IC患者血清中特异性抗体的血清学诊断方法成为研究热点.本文旨在建立检测念珠菌烯醇化酶(Enolase, Eno)、果糖二磷酸醛羧酶(fructose-bisphosphate aldolase, Fba1)特异性抗体的ELISA方法,评估其在IC早期诊断中的应用价值.方法 利用基因重组技术获得的Eno、Fba1重组蛋白作为包被抗原,建立测定人血清相应抗体的ELISA,并对方法的敏感性、特异性进行考查.结果 建立了检测IC患者血清抗Eno、抗Fba1抗体的ELISA,cut-off值分别为吸光度(A)值0.370和0.610.ELISA结果显示,IC患者血清中的抗Eno、抗Fba1抗体水平明显高于健康对照和非IC患者对照(P<0.001).抗Eno和抗Fba1对诊断IC的敏感性和特异性分别为72.3%(73/101)和98%(196/200),87.1%(88/101)和96%(192/200),联合检测可提高敏感性至91.0%.且与细菌感染及其他真菌感染患者(如曲霉病)无交叉反应.IC患者中40.6% (41/101)可以在血培养阳性前检测到抗Eno、49.5%(50/101)可以在血培养阳性前检测到抗Fba1.结论 建立了检测抗Eno、抗Fba1抗体的ELISA法,检测念珠菌菌丝相分泌蛋白IgG抗体特异性和灵敏度良好,在念珠菌感染诊断中具有潜在临床应用价值.