O-糖基化在酪氨酸羟化酶功能调节中的作用
Medical Journal of Wuhan University(2014)
摘要
目的:观察酪氨酸羟化酶(TH)O-糖基化和磷酸化水平在6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞(人神经母细胞瘤细胞)帕金森病细胞模型中的变化,探讨O-糖基化在酪氨酸羟化酶功能调节中的作用.方法:用6-OHDA处理SH-SY5Y细胞作为模型组;用相同终浓度的6-OHDA加上四氧嘧啶(ALX,O-糖基化转移酶抑制剂)处理SH-SY5Y细胞作为模型治疗组;用ALX处理SH-SY5Y细胞作为治疗对照组.用Western印迹检测SH-SY5Y细胞TH的表达以及其O-糖基化和磷酸化水平的变化,采用ELISA法检测各组细胞多巴胺的浓度.结果:6-OHDA浓度依赖性地引起SH-5YSY细胞存活率下降,12.5-50.0 μmol/L 6-OHDA处理细胞24 h,细胞存活率为对照组的96.9%-72.3%;100 μmol/L 6-OHDA处理细胞24 h后存活率低于50%.50 μmol/L 6-()HDA处理SH-SY5Y细胞24 h引起细胞TH表达的下降、糖基化水平升高和磷酸化水平下降;ALX处理SH-SY5Y细胞24 h后,TH O-糖基化水平下降、磷酸化水平升高,但TH的表达无改变,总的多巴胺的浓度升高了11.5%±3.4%(P<0.01);用四氧嘧啶+50 μmol/L 6-OHDA处理SH-SY5Y细胞24 h后,与模型组比较,TH表达无明显改变,O-糖基化水平下降,磷酸化水平上升,总多巴胺浓度升高8.7%±2.0%(P<0.01).结论:在6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病细胞模型中,TH的O-糖基化水平升高,磷酸化水平的下降;通过抑制酪氨酸羟化酶的O-糖基化水平可以上调其活性,引起多巴胺分泌增多,这一作用可能同O-糖基化与磷酸化的竞争性抑制有关.
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关键词
o-glycosylation
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