鸡胸肉中钙激活酶的纯化研究

对宰后10 min的鸡胸肉经匀浆后利用超高速冷冻离心、硫酸铵分级沉淀、离子交换层析和疏水层析等技术,从中分离纯化出μ-钙激活酶(μ-calpain)和μ/m-钙激活酶(μ/m-calpain).对分离纯化过程各主要步骤中的酶总活性、比活性等参数进行测定,同时采用活性电泳对纯化过程的样品进行分析.结果表明:样品通过Hitrap Capto DEAE层析柱,可以将μ-calpain和μ/m-calpain分别洗脱下来,μ-calpain比活性为1.02 U·mg-1,μ/m-calpain的比活性为3.04 U-mg-1；所得μ-calpain及μ/m-calpain样品分别依次经过Phenyl Sepharose 6 FF层析柱和Mono Q层析柱,最后得到的μ-calpain和μ/m-calpain比活性分别为26.89和34.96 U· mg-1.结果表明,随着纯化步骤的增加,鸡胸肉中的钙激活酶纯度逐步增加,并得到了较有效的纯化.