黄芪中新型FLT3受体相互作用凝集素的生物学活性分析

目的:从黄芪中提取、纯化Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)受体相互作用凝集素(FRIL),分析鉴定其生物学活性.方法:采用亲和层析方法纯化黄芪水浸粗提物,用BCA蛋白测定法测定FRIL含量,糖抑制红细胞凝集实验鉴定FRIL与糖结合的生化特性;培养Raji细胞,分为对照组和20及40 mg·L-1FRIL组;培养FLT3受体高表达细胞株HL-60细胞,分别设置对照组和2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mg· L-1 FRIL组;流式细胞术和MTT法分别检测FRIL对Raji细胞和HL-60细胞的增殖作用.结果:从黄芪中分离得到含有4个亚基的凝集素FRIL达到27 mg; FRIL主要与α-D-甘露糖有很高的亲和性,证实FRIL能与糖专一性结合具有凝集素活性;40 mg·L-1FRIL组Raji细胞凋亡率明显低于20 mg·L-1 FRIL组(P＜0.01);与对照组比较,5.0～40.0mg·L-1FRIL组HL-60细胞体外增殖活性增加(P＜0.05).结论:成功从黄芪中分离得到具有凝集素活性的FRIL蛋白,对表达FLT3受体的细胞具有刺激增殖作用.