超声辐照参数对体外基因转染效果的影响

目的 探讨超声辐照参数对体外基因转染效果的影响及最佳转染条件.方法 将293T细胞种植于24孔板内,24 h后更换为转染液进行超声辐照,EGFP质粒浓度为1 mg/ml,每孔加入15 μg;超声强度分为1.5、2.0、2.5W/cm2,辐照时间分为30、45、60 s,微泡浓度分为20％、30％、40％;每个参数相互组合并重复4次.转染后72 h于荧光显微镜下观察细胞内绿色荧光蛋白的表达,以流式细胞仪检测荧光细胞比例,CCK-8检测细胞存活率,计算转染效率.结果 超声声强、辐照时间、微泡浓度均对转染效率有显著影响.辐照条件为2.0 W/cm2、辐照时间45 s、微泡浓30％时转染效率最高,可达(35.25±1.40)％.结论 超声辐照参数共同影响转染效果,低条件下相互协同,高条件下相互抑制,选择合适的辐照参数是超声介导体外基因转染的重要因素.