抗氟喹诺酮类抗生素单抗的研制及其检测应用

用与牛血清白蛋白交联的环丙沙星免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,获得1株能稳定传代并分泌抗氟喹诺酮类药物的单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞9H9,用杂交瘤细胞制备单克隆抗体腹水.单克隆抗体对环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、达氟沙星、诺氟沙星、依诺沙星、麻保沙星、洛美沙星、沙拉沙星、双氟沙星均有免疫反应,且50％抑制质量浓度分别为达到3.21、3.01、8.15、4.85、7.75、3.70、9.83、6.21、11.62、200.70 ng·mL-1.利用单抗建立了检测蜂蜜、鸡肉组织、牛奶中氟喹诺酮类药物残留的间接竞争酶联免疫吸附测试(CI-ELISA)和免疫胶体金试纸条法.CI-ELISA方法的IC50及IC10分别为3.21 ng·mL-1和0.42 ng·mL-1.添加试验和特异性分析表明,免疫胶体金试纸条能用于检测蜂蜜、鸡肉组织、牛奶中的氟喹诺酮类药物残留,且检测上述样品中环丙沙星残留的灵敏度分别为5、20、30 ng·mL-1.