泰勒焦虫重组蛋白 TaSP-Tams1-SPAG1间接ELISA 检测方法的建立

Yu-rong WEI,Zhong YI,Wen-ge MA,Hui-ling GUO,Yin-zhen XIANG,Xiao-yun MI,Zhi CHEN,Jie WEI,Shu-kui MIAO,Guo-liang WU,Qiao-fen QI,Taiwaikuli Ainiwaer,Jiong HUANG

Journal of Xinjiang Agricultural University（2013）

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Abstract

以真核表达的焦虫表面抗原重组蛋白 TaSP-Tams1-SPAG1作为 ELISA 板包被抗原,通过方阵实验确定抗原包被浓度,探索抗原包被时间、温度、一抗及二抗血清稀释度及作用时间,建立牛环形泰勒焦虫表面抗原重组蛋白 ELISA 方法.结果得出 TaSP-Tams1-SPAG1的最佳包被浓度为10μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100, ELISA 阳性反应的临界值为 OD 492nm ≥0．348,重复试验变异系数小于12％,所建立的 ELISA 方法不与牛巴贝斯虫及牛瑟氏泰勒虫血清发生反应.TaSP-Tams1-SPAG1为抗原建立的 ELISA 方法特异性强,敏感度高,重复性好,为牛环形泰勒焦虫病的准确检测及防治提供技术支持.

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Key words

theileria annulata,recombinant protein antigens,elisa

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