二甲双胍对糖基化终末产物诱导的成纤维细胞凋亡及相关蛋白caspase-3、Bax及Bcl-2表达的影响

目的：探讨晚期糖基化终末产物（AGEs）对原代人皮肤成纤维细胞凋亡的影响，以及二甲双胍（Metformin）对原代皮肤成纤维细胞凋亡是否存在保护作用。方法取对数生长期的皮肤成纤维细胞，分为空白组，BSA对照组（300μg/mL），AGEs刺激组（100、200、300μg/mL），药物组（AGEs 300μg/mL+Metformin 1 mmol/L），采用CCK-8检测24、48、72 h细胞凋亡情况；Western Blot检测细胞培养72 h后凋亡相关蛋白caspase-3、Bax、Bcl-2表达情况。结果 CCK-8结果显示AGEs诱导皮肤成纤维细胞凋亡呈浓度及时间依赖性，AGEs 300μg/mL诱导72 h后可见细胞凋亡明显增多（0.72±0.02 vs 1±0.04，P<0.05），加入二甲双胍后可对成纤维细胞起一定保护作用（0.98±0.02 vs 0.72±0.02，P<0.05）。Western Blot显示AGEs 300μg/mL刺激成纤维细胞72 h后， caspase-3、Bax蛋白表达增加（P<0.05），而Bcl-2蛋白表达下降（P<0.05），Bcl-2/Bax比值下降（P<0.05），二甲双胍作用后caspase-3、Bax蛋白表达水平较刺激组明显下降（P<0.05），而Bcl-2及Bcl-2/Bax比值则明显上升（P<0.05）。结论 AGEs可诱导人皮肤成纤维细胞凋亡增加，二甲双胍可以通过调控caspase-3、Bax及Bcl-2表达，从而起到抗凋亡作用。