H9N2亚型流感病毒核酸参考品研制及荧光RT-PCR检测验证

Song Jie,Li Cui,Li Jing,Zhang Shuang,Fan Wenhui,Liu Lirong, Jia Hongyi, Yu Aibi, Hao Ke,Niu Chunyan,Wang Jing,Zhao Qizu,Liu Wenjun

Sheng wu gong cheng xue bao = Chinese journal of biotechnology（2018）

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摘要

从H9N2亚型流感病毒A/chicken/Hunan/04.14 (H9N2)核酸中扩增了HA基因的编码序列,克隆测序后,采用体外转录方法制备RNA.用RNA保存液稀释至含量约109 copies/μL.分装后进行均匀性和稳定性检验,通过4家实验室协作标定,取平均值作为定值结果.此外,文中建立的实时荧光定量PCR (qPCR)快速检测技术,对临床样品进行准确检测验证,检测限可达10个拷贝.结果表明,文中制备的核酸参考品可作为H9N2亚型流感病毒核酸快速检测方法的阳性定量参考品.

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关键词

H9N2 subtype influenza virus,HA gene,real-time RT-PCR,reference materials

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