吴茱萸次碱通过抑制Notch1/eIF3a信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化

研究吴茱萸次碱(Rut)是否通过抑制Notch1/真核翻译起始因子3a(eIF3a)信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,以及作用是否与促进降钙素基因相关肽(CGRP)合成与释放,进而抑制肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)有关.雄性SD大鼠随机分为5组:对照组,博莱霉素组,Rut不同(100,300 mg· kg-1)剂量组及辣椒素(Cap)+ Rut(300 mg· kg-1)剂量组,每组12只.采用博莱霉素(5 mg·kg-1)气管滴注诱导肺纤维化大鼠模型.Cap+ Rut组于造模前1天和造模后第7,14,21天分别皮下注射Cap(50 mg·kg-1)耗竭内源性CGRP.造模后第29天处死动物,颈动脉采血ELISA法测定血浆CGRP含量.HE染色和Masson染色观察肺组织病理学及胶原沉积的变化.免疫组化、qPCR和(或)Western blot法检测肺组织CGRP,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),E钙粘蛋白(E-cadherin),紧密连接蛋白-1(ZO-1),波形蛋白(vimentin),I型胶原(collagen I),Notch1,eIF3a mRNA及蛋白表达.结果显示,与对照组相比,博莱霉素组大鼠肺组织结构破坏,肺泡间隔增宽,大量炎性细胞浸润以及成纤维细胞明显增殖,胶原沉积明显增多,同时collagen I,α-SMA,vimentin,Notch1,eIF3a的表达明显升高,而E-cadherin,ZO-1,CGRP的表达及血浆CGRP的水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01).与博莱霉素组相比,不同剂量Rut连续给药4周后能明显改善肺组织损伤,显著降低肺组织胶原的沉积,明显提高E-cadherin,ZO-1,CGRP的表达及血浆CGRP的水平,同时降低col-lagen I,α-SMA,vimentin,Notch1,eIF3a的表达(P＜0.05或P＜0.01).而用辣椒素耗竭内源性CGRR后能够取消吴茱萸次碱的这些作用.由此推测,吴茱萸次碱可能通过抑制Notch1/eIF3a信号通路,减缓肺泡上皮细胞EMT的进程,从而缓解博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,此作用与促进CGRP的合成与释放有关.