甲胺化衍生结合基于硅氢化物固定相的正相色谱用于单克隆抗体药物的N-糖基化表征

Yao Wang,Gaodao Liang,Qing Han,Xun Hu,Qiwei Zhang,Zhenyu He

CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY（2018）

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摘要

采用甲胺化衍生结合基于硅氢化物固定相的正相色谱( SiH-NPC)分析单抗的 N-糖基化.样品经酶切、甲胺化衍生、纯化后由液相色谱-质谱进行分析.结果表明,相较于亲水相互作用色谱( HILIC),SiH-NPC 分离机制不同,使用常规的无盐流动相即可实现高分离度,避免污染质谱,色谱柱结构稳定,使用寿命长,更适合快速分析.结合唾液酸衍生方法,SiH-NPC在液相色谱-质谱联用鉴定酸性糖和糖异构体方面呈现显著优势,在生物制药行业中具有重要的应用潜力.

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关键词

methylamidation, silica-hydride, liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS), N-glycans, monoclonal antibodies (mAbs)

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