低能量激光联合压力对成骨细胞ALP活性和胞内Ca2+浓度的影响

SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS(2016)

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摘要
探讨低能量激光照射(low‐level laser irradiation ,LLLI)联合压力刺激对人成骨样细胞的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase ,ALP)活性和胞内Ca2+浓度的变化规律的影响,揭示LLLI促进正畸牙齿压力侧骨改建的机制。将对数生长期的人成骨样细胞M G‐63随机分为4组,对细胞施加压力采用Fo rcel四点弯曲体外细胞力学加载装置,用Ga‐Al‐As半导体激光器(808 nm ,500 mW)进行照射。组Ⅰ(对照组):不加力,不进行激光照射。组Ⅱ(压力组):利用细胞加载装置对细胞加压力,加力板变形量为3000 ustrain ,加力时间1 h。组Ⅲ(激光组):激光照射1 min ,剂量3.75 J · cm-2。组Ⅳ(联合组):细胞加力(加力方式同组Ⅱ)后,激光照射(方式同组Ⅲ)。四组细胞均用分光光度计测量细胞内ALP活性。第二部分实验对胞内Ca2+浓度变化进行测定,将M G‐63细胞分为2组:压力组和激光张力组,2组细胞分别加力0,5,15,30,60 min ,激光压力组再激光照射1 min后收取细胞。用荧光探针Fluo‐3‐AM 测定成骨样细胞内Ca2+浓度。结果显示第一部分实验与对照组相比,其余3组的ALP活性均明显增强( p<0.05),但联合组的ALP活性分别低于压力组和激光组(p<0.05)。第二部分实验显示:第1组压力引起胞内Ca2+浓度随时间剧烈变化,第2组变化曲线平缓,但C a2+浓度水平两组无明显差异。由此得出结论适宜的压力和弱激光及联合应用均能增加成骨细胞的ALP活性,两者联合应用时较单独应用时成骨细胞的 ALP活性稍有降低,压力组和激光压力组胞内C a2+浓度的变化曲线不同,说明在正畸牙齿的压力侧,低能量激光的应用可以降低由压力引起的成骨细胞活性增加,减少成骨,破骨相对增加,促进牙齿移动,LLLI极可能通过调节Ca2+浓度的变化规律来调节成骨细胞活性。
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关键词
Low-level-laser-irradiation(LLLI),Osteoblast,Stress,Alkaline phosphatase (ALP)
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