应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量

旨在应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量.使用TSKgel G4000SWXL (7.8 mm×30 cm)色谱柱,以pH 7.2的缓冲盐体系作为流动相,流速为0.6 mL/min,进样量为100μL,检测波长为259nm.以口蹄疫病毒(O型)灭活146S抗原纯化样品建立标准曲线;使用灭活抗原液配制3份口蹄疫灭活疫苗,并进行精密度、重复性、特异性、耐受性验证;应用该方法快速测定16批疫苗的146S含量.结果表明,抗原浓度在0.56-67.42 μg/mL范围内,其峰面积与浓度的线性关系良好(R2=0.996,n=10),3份疫苗146S抗原测定回收率分别为93.6％ (RSD=2.7％,n=3)、102.3％ (RSD=2.6％,n=3)、95.5％ (RSD=5.1％,n=3),方法重复性好、准确性强(RSD=0.5％,n=6),且操作简便、高效,对16批疫苗的测定结果较理想.应用该方法有望快速高效地检测口蹄疫灭活疫苗的146S抗原含量,为疫苗的质量控制提供有力支持.