CD44分子岩藻糖基化修饰对兔BMSCs流体黏附力的影响

目的 探讨CD44分子岩藻糖基化修饰对兔BMSCs流体黏附力的影响.方法 采用密度梯度离心结合贴壁培养的方法体外分离纯化获得兔BMSCs,倒置显微镜观察细胞生长状况,流式细胞仪检测细胞表面MSCs相关抗原CD44、CD34、CD29、CD105的表达.使用α-1,3-岩藻糖转移酶Ⅵ(α-1,3-fucosyltransferaseⅥ,FTⅥ)对兔BMSCs进行体外岩藻糖基化处理作为实验组,以未经岩藻糖基化处理的BMSCs作为对照组,采用流式细胞仪检测唾液酸化LewisX (sialyl-LewisX,sLex)阳性率及E-选择素结合率.使用Hank平衡盐溶液重悬的岩藻糖基化BMSCs作为实验组(A组),未经岩藻糖基化修饰的BMSCs作为研究对照组(B组),添加EDTA冲洗的岩藻糖基化兔BMSCs作为阴性对照组(C组),利用平行板流室黏附试验检测兔BMSCs流体黏附力.结果 兔BMSCs形态以长梭形为主,生长旺盛;第3代BMSCs CD44、CD29、CD105呈阳性表达,而CD34呈阴性表达.实验组sLex阳性率为32.52％±1.76％,显著高于对照组的1.48％±0.51％,差异有统计学意义(t=29.277,P=0.000);实验组E-选择素结合率为41.05％±1.84％,显著高于对照组的4.33％±0.92％,差异有统计学意义(t=35.674,P=0.000).随着流体剪切力的增加,A组人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cells,HUVEC)表面黏附的BMSCs数量先升高后降低,而B、C组HUVEC表面几乎无BMSCs黏附.各剪切力作用下,A组HUVEC表面黏附的BMSCs细胞数均显著多于B、C组,差异有统计学意义(P＜0.05),B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CD44分子岩藻糖基化修饰能够增强兔BMSCs的流体黏附力.