雌二醇对乳腺癌假体植入术后表皮葡萄球菌生物膜形成的影响研究

目的 探讨雌二醇对乳腺癌术后假体表面表皮葡萄球菌生长以及生物膜形成能力及其结构的影响.方法 取表皮葡萄球菌标准株ATCC35984,调整浓度至1×107CFU/mL或1×108 CFU/mL,与硅胶片和终浓度为125 pmol/L的雌二醇混合培养,制备硅胶材料表面细菌生物膜体外模型.于培养后4、6、12、24、48、72 h,采用结晶紫染色半定量检测硅胶材料表面细菌生物膜形成能力,XTT法检测硅胶材料表面细菌生长动力;根据以上检测结果,选择细菌悬液实验浓度.取实验浓度表皮葡萄球菌ATCC35984悬液以及终浓度为50、125、250、500 pmol/L的雌二醇悬液,分别与硅胶片混合培养制备生物膜体外模型,以未添加雌二醇悬液(0 pmol/L)作为对照;另取实验浓度表皮葡萄球菌ATCC12228悬液,同法制备模型,作为阴性对照.于培养后4、6、12、24、48、72 h同上法检测硅胶材料表面细菌生长动力及生物膜形成能力,扫描电镜观察硅胶材料表面细菌生物膜超微结构;培养6、12、24 h激光共聚焦显微镜观察硅胶材料表面细菌生物膜厚度.结果 根据XTT法及结晶紫染色半定量检测结果,选择浓度为1×107 CFU/mL细菌悬液进行实验.XTT法检测示,ATCC12228和ATCC35984菌株分别在4、6、12、24、72 h和4、6、24、72 h时,其125、250、500 pmol/L组细菌生长速度快于0、50 pmol/L组(P＜0.05),4、6、72 h时500 pmol/L组快于125、250 pmol/L组(P＜0.05),72 h时250 pmol/L组快于125 pmol/L组(P＜0.05),其余组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);同一时间点两种菌株相同雌二醇浓度组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结晶紫染色半定量检测:各时间点ATCC12228菌株各雌二醇浓度组生物膜形成均为阴性.而ATCC35984菌株培养4h即有生物膜形成,随时间延长逐渐增厚,24 h时达峰值;培养4、6h,0 pmol/L组生物膜厚度大于125、250、500 pmol/L组(P＜0.05);12 h开始125 pmol/L组生物膜最厚,与其他组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).激光共聚焦显微镜观察示,ATCC35984菌株在培养6h时125、250、500 pmol/L组的生物膜厚度小于0、50 pmol/L组(P＜0.05),其余组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);之后各组生物膜厚度逐渐增加,12、24 h时125 pmol/L组生物膜厚度明显大于其他浓度组(P＜0.05).扫描电镜观察示,各时间点与其他浓度组相比,125 pmol/L组形成的生物膜结构范围最广,结构最致密、最丰富、层次最多.结论 高浓度雌二醇可促进表皮葡萄球菌生长、生物膜形成和生物膜的成熟.