人源化慢性髓系白血病小鼠模型的建立

目的:构建BABL/c裸鼠人源化慢性髓系白血病(CML)模型,为CML实验研究提供动物模型.方法:将4周龄BALB/c裸鼠在无菌条件下行脾切除术,环磷酰胺腹腔注射及全身亚致死量照射预处理(sublethal irradiation,SLI预处理)后,经尾静脉注射CML初诊患者骨髓单个核细胞.实验分为2组:A组(单纯预处理组)和B组(白血病细胞接种组),对A组裸鼠进行SLI预处理,经尾静脉注入0.3 ml的PBS;给B组接种的细胞为CML患者骨髓单个核细胞4.5×107个.观察裸鼠的体重、饮食变化、血象及细胞形态;流式细胞仪检测人CD13、CD45的表达;将恶病质裸鼠处死并取骨髓进行病理学检查及BCR/ABL融合基因的RT-PCR检测.结果:①B组的裸鼠静脉输注人的单个核细胞后,21 d开始出现不同程度的活动度减低,食量下降,消瘦,脊背拱起,最后出现恶病质而死亡.生存时间为46±4.2d(45-57 d).②B组小鼠第3周检测到外周血中CD13+ CD45+细胞,占2.56％±0.36％,第6周占4.97％±0.43％,两个时间点比较差异有统计学意义(P＜0.05),而A组小鼠第3周和第6周CD13+ CD45+细胞分别为0.56％±0.05％,0.44％±0.07％.B组CD13+ CD45+细胞的比例明显高于A组(P＜0.05).③病理学检查显示,裸鼠处死,骨髓HE染色后B组鼠见增生活跃,可见白血病细胞.④从小鼠的骨髓中同样扩增出BCR/ABL融合基因.结论:用SLI预处理法初步成功建立了人源化BALA/c裸鼠CML模型,其白血病发病时间较长,建模成本低廉并且技术简单.