放射性131I标记胶原-壳聚糖复合微球的制备及其杀伤肝癌细胞的体内研究
Sichuan da xue xue bao. Yi xue ban = Journal of Sichuan University. Medical science edition(2018)
摘要
目的 用壳聚糖及胶原这两种可降解生物材料,制备能用于131I标记的放射性核素微球并探究其对肝癌的治疗效果.方法 以Ⅰ型胶原蛋白和壳聚糖为主要材料,戊二醛为交联剂,利用乳化交联法制备胶原-壳聚糖复合微球.电镜下观察微球表征,测量并统计微球的粒径.通过氯胺T法对微球进行131I标记,计算标记率.等量1a1I-微球分别置于PBS和人血清中192 h,探究其体外稳定性.BALB/C裸鼠皮下一次性注射人肝癌细胞HepG2约106个,构建裸鼠人肝癌细胞模型.28d后,131I-微球、空白微球、PBS分别一次性注入荷人肝癌裸鼠模型的皮下瘤中(每组5只),治疗7d后处死裸鼠.取血和心、肺、肝、脾、胃、小肠、肾、肌肉、脑、骨、甲状腺、皮下肝癌组织检测标记微球在裸鼠体内的分布,同时对皮下肝癌组织进行组织病理学HE染色,检测标记微球对肝癌细胞的杀伤效果.结果 本研究成功制得胶原-壳聚糖微球,电镜显示微球成球性好,表面光滑,粒径较均匀,平均粒径为(5.1±1.2) μm.其131I标记率为86.10%,置于PBS及血清192 h后,碘标记率分别为92.00%、83.00%,131I-微球依然保持高稳定性.治疗7d后裸鼠体内分布实验显示放射性主要集中在皮下肿瘤组织,其他组织几乎没有放射性计数.皮下肿瘤组织病理切片显示PBS组见大量肝癌细胞,标记微球后周围的肝癌细胞大量死亡,空白微球组中微球周围仅有少量的炎性细胞,未引起局部强烈的免疫反应.后两组微球均未见明显降解.结论 本研究制得的胶原-壳聚糖具有很高的131I标记率、体内外稳定性及良好的肿瘤杀伤效果.
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关键词
Chitosan,Collagen,Liver cancer,Microsphere,Radionuclide therapy,¹³¹I
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