pH2AX蛋白在单次热应激致小鼠睾丸生殖功能可逆性中的表达变化

目的:探讨pH2AX在单次热应激致小鼠睾丸生殖功能可逆性中的表达变化. 方法:C57雄性小鼠24只,随机按1、7、14 d分为对照组(n=6)和热应激组(n=6).热应激组和对照组小鼠下腹部分别置于43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7、14 d取睾丸组织.TUNEL检测睾丸细胞凋亡情况,免疫组化染色检测pH2AX蛋白定位及表达,Western印迹检测pH2AX蛋白表达水平. 结果:TUNEL结果显示,在热应激后的第1天生精小管中的凋亡细胞数量最多,第7、14天细胞凋亡基本消失.免疫组化显示,pH2AX蛋白在睾丸生精小管基底膜处细胞核表达.Western印迹检测显示,与对照组相比,热应激后的第1天,pH2AX蛋白表达明显增加(0.47 ±0.02 vs 1.61 ±0.04,P＜0.01);第7天(0.85 ±0.03)与热应激处理第1天相比pH2AX蛋白表达显著减少(P＜0.01);第14天(1.72±0.02)与热应激处理第1、7天及对照组相比pH2AX蛋白表达显著增加(P均＜0.01).结论:小鼠睾丸热应激处理后pH2AX蛋白表达量在睾丸中出现动态变化,这种变化与热应激后睾丸生精细胞的增殖分裂相关.