用于乳糖含量测定的新型氨基键合硅胶色谱固定相的制备及评价

基于合成的氨基键合硅胶色谱固定相,按照2015版《中华人民共和国药典》乳糖项下含量测试方法,建立了高效液相色谱-示差折光检测(HPLC-RI)分离乳糖与蔗糖的分析方法.考察了3种不同类型的氨基色谱固定相制备的色谱柱(300 mm×4.6 mm,5 μm)对乳糖和蔗糖的保留时间、分离度和峰面积稳定性等色谱行为的影响.以乙腈-水(70:30,v/v)为流动相进行等度洗脱,流速为1.0 mL/min,进样量为10 μL.结果表明:使用异丙基侧链保护的氨基色谱柱时,乳糖和蔗糖的分离度为3.03,实现了二者的良好分离,且各目标物峰形良好;乳糖峰面积的RSD仅为1.14%,小于药典规定的2.0%.该法满足2015版《中华人民共和国药典》方法中乳糖含量测定的要求,适合作为乳糖含量测定的质控色谱柱.