miR-212/132在原发性肝癌患者血清中的表达及其对高尔基体糖蛋白73的靶向调控

目的 探讨miR-212和miR-132在原发性肝癌患者血清中的表达及其对高尔基体糖蛋白(GP)73的靶向调控.方法 收集2015年1月至2016年12月泰州市人民医院住院的肝癌患者、慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者和健康对照者资料,用荧光定量PCR检测血清miR-212和miR-132含量,分析血清miR-212或miR-132表达与肝癌患者临床病理特征的关系.用Spearman秩相关分析研究肝癌患者血清miR-212/miR-132与GP73的相关性.Western印迹检测GP73蛋白表达水平,MTT检测细胞存活率.数据经Levene's方差齐性检验.2个样本均数比较使用独立样本t检验,2个以上样本均数比较使用ANOVA检验.相关性分析用Spearman检验.结果 共收集到90例肝癌患者、60例慢性乙型肝炎患者、68例肝硬化患者和100名健康对照者资料.肝癌患者血清miR-212和miR-132相对表达水平为miR-212:0.046 6±0.024 7和miR-132:0.005 9±0.003 0,健康对照者为miR-212:0.979 7±0.259 5和miR-132:1.001 8±0.249 9、慢性乙型肝炎患者为miR-212:0.588 2±0.216 5和miR-132:0.345 7±0.233 8、肝硬化患者为miR-212:0.313 8±0.153 3和miR-132:0.080 1±0.042 7.与健康对照相比,肝癌、慢性乙型肝炎、肝硬化患者血清中miR-212(t值分别为10.26、20.86和35.80,P值均＜0.01)和miR-132(t值分别为16.55、36.09和39.85,P值均＜0.01)表达均降低;肝癌患者血清miR-212或miR-132相对表达量与甲胎蛋白(miR-212:t=-4.46;miR-132:t=-4.83,P值均＜0.01)、TNM (T:原发灶,N:淋巴结,M:远处转移)分期(miR-212:t=6.569;miR-132:t=7.31,P值均＜0.01)、肿瘤分化程度(miR-212:t=5.268;miR-132:t=5.914,P值均＜0.01)以及合并门静脉癌栓均呈负相关(miR-212:t=5.16;miR-132:t=3.681,P值均＜0.01);但是与肿瘤大小无相关性(miR-212:t=0.687;miR-132:t=0.887,P值均＞0.05).此外,肝癌患者血清miR-212(t=-0.709,P＜0.01)或miR-132(rs=-0.877,P＜0.01)均与GP73呈负相关.HepG2细胞中过表达miR-212或miR-132均能显著抑制GP73的3'-UTR活性和表达;干扰miR-212或miR-132均能显著增加GP73的3'-UTR活性和表达.过表达GP73能够取消过表达miR-212或miR-132引起的肝癌细胞存活率下降.结论 肝癌患者血清miR-212和miR-132表达显著下降,与肝癌的发生、发展和转移密切相关;肝癌细胞中miR-212和miR-132通过靶向性调控GP73表达来发挥抑制肝癌增长的作用.