佛波酯联合脂多糖诱导THP-1炎症细胞模型的优化及评价

目的 优化条件建立人急性单核白血病细胞THP-1炎症细胞模型,评价其对磷酸二酯酶抑制剂类抗炎剂咯利普兰的响应.方法 THP-1细胞经佛波酯(PMA)诱导分化、脂多糖(LPS)刺激,ELISA检测细胞上清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平.考察PMA和LPS剂量及其作用时间获得较优模型;于LPS同时加入咯利普兰考察此THP-1炎症细胞模型对抗炎作用的响应.结果 THP-1单核细胞经PMA诱导分化24h呈巨噬细胞形态,延长至48 h细胞形态不变,诱导的细胞经LPS刺激产生显著升高的TNF-α和IL-6.PMA在100 ng/mL较50 ng/mL诱导分化THP-1经LPS刺激所产生TNF-α水平显著升高,且随LPS剂量增加而增加并在LPS达0.2 μg/mL后趋于恒定;IL-6在PMA 100 ng/mL及LPS≥1 μg/mL时释放明显.100 ng/mL PMA联合0.5 μg/mL LPS相较于0.1 μg/mL LPS刺激THP-1产生TNF-α被咯利普兰抑制更显著.结论 100 ng/mLPMA诱导分化的THP-1细胞在LPS刺激下炎性因子水平显著升高;100ng/mL PMA联合不低于0.2 μg/mL LPS刺激THP-1细胞可获较优炎症细胞模型,此模型对抗炎剂作用更敏感.