HPLC-UV法测定人血浆及尿中多尼培南

建立HPLC-UV法测定人血浆及尿中多尼培南(DP)的质量浓度,用于DP人体药代动力学研究。采用Ultimate XB-C18(150 mm×4.6 mm×3μm)色谱柱,血浆及尿样测定用流动相分别为10 mmol/L醋酸钠∶乙腈∶三乙胺(体积比94∶6∶0.1,冰乙酸调p H为4.51)和8 mmol/L醋酸钠∶乙腈∶三乙胺(体积比95.5∶4.5∶0.1,冰乙酸调p H值为4.99),流速均为1 m L/min,检测波长为297 nm。血浆样品经乙睛沉淀蛋白,再用二氯甲烷反洗后取上清液进样,以美罗培南(MRP)做内标;尿样直接用水稀释后进样,外标法定量。血药浓度在0.0625~200μg/m L范围内与峰面积线性关系良好,定量限为0.0625μg/m L,批内精密度在1.0%~6.0%之间,批间精密度在3.0%~6.7%之间,方法回收率在92.4%~104.5%之间,预处理回收率在91.2%~103.8%之间。尿药浓度在0.625~4 800μg/m L范围内与峰面积线性关系良好,定量限为0.625μg/m L,批内精密度在0.7%~4.0%之间,批间精密度在1.1%~5.3%之间,方法回收率在94.1%~106.7%之间。该方法具有简便、灵敏、准确等特点,适用于人血浆及尿中多尼培南质量浓度的测定。