乙酰辅酶A合成酶2在结直肠癌中的表达及生物学功能

目的 探讨乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)在结直肠癌中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学方法检测比较组织芯片上74例结直肠癌组织与40例正常结直肠上皮组织标本中ACSS2的表达,并分析其与结直肠癌患者的临床病理特点的关系.同时应用RNA干扰技术下调肠癌细胞系中ACSS2的表达,检测ACSS2-siRNA(ACSS2-siA和ACSS2-siB,分别为实验组A和实验组B)干扰后结直肠癌细胞株Lovo和HCT116细胞的增殖、侵袭迁移和上皮间质转化(上皮间质转化标志物钙黏附蛋白E-cadherin和Snail)情况.结果74例结直肠癌组织中,ACSS2表达程度(6.284比3.625)与阳性细胞百分比(69.9%比45.1%)高于40例正常组织(均P<0.01).使用RNA干扰降低Lovo与HCT116中ACSS2的表达后,增殖实验显示,等量细胞铺板生长5 d后,实验组细胞计数均低于对应对照组(A450值分别为:Lovo对照组:1.758 ± 0.041;Lovo实验组A: 1.485 ± 10.026;Lovo实验组B: 1.371 ± 0.049.HCT116对照组:2.609 ± 0.038;HCT116实验组A:2.260 ± 0.042,HCT116实验组B:2.295 ± 0.029).侵袭实验显示,Lovo和HCT116实验组穿膜的细胞数目均低于对应细胞系的对照组(每个视野下细胞数分别为:Lovo对照组:225 ± 5; Lovo实验组A: 40 ± 5; Lovo实验组B:79 ± 3,P<0.05.HCT116对照组:198 ± 7;HCT116实验组A:96 ± 7;HCT116实验组B:77 ± 9, P < 0.05).定量PCR检测显示,在Lovo细胞系中,ACSS2 RNA干扰后,E-cadherin的mRNA水平显著上调(对照组:1.000 ± 0.211;实验组A: 3.403 ± 0.207;实验组B:2.658 ± 0.420, P < 0.05), Snail的mRNA水平显著下调(对照组:1.000 ± 0.085;实验组A:0.468 ± 0.030;实验组B:0.499 ± 0.088, P < 0.05);HCT116细胞系中结果类似,Snail的mRNA水平显著下调(对照组:1.000 ± 0.118;实验组A:0.265 ± 0.020;实验组B:0.194 ± 0.017,P < 0.05),但E-cadherin的mRNA水平上调不明显(对照组:1.000 ± 0.121,实验组A:1.349 ± 0.197,实验组B:1.528 ± 0.147, P > 0.05).结论 结直肠癌组织中的ACSS2表达显著高于正常结直肠组织.ACSS2可能与肿瘤迁移和上皮间质转化活动有关.