乙型肝炎病毒X基因对Fas介导的肝细胞凋亡的影响

目的 研究乙型肝炎病毒X基因(HBx)对HepG2细胞中Fas介导的肝细胞凋亡的影响.方法 用脂质体转染法将HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-X瞬时转入HepG2细胞,以转染空质粒pcDNA3.1(+)的细胞及未转染的HepG2细胞为对照.转染后72 h收集细胞,通过RT-PCR及Western blot法检测HBx mRNA和蛋白质的表达,并通过RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA的表达量变化.采用激动型Fas单克隆抗体抗-Fas CH11分别作用于HepG2-HBx细胞和HepG2-3.1细胞后,通过CCK-8和流式细胞术检测细胞毒性和凋亡.两样本比较用f检验. 结果 RT-PCR及Western blot证实成功构建细胞株.HepG2-HBx且RT-PCR结果显示HepG2-HBx细胞中Bcl-2 mRNA相对表达量显著高于HepG2-3.1及HepG2(P＜0.05),而Bax mRNA相对表达量显著低于HepG2-3.1及HepG2(P＜0.05);CCK-8和流式细胞术检测结果显示抗-FasCH 11处理HepG2-HBx细胞毒性及细胞凋亡率均低于HepG2-3.1及HepG2. 结论 HBx可以抑制Fas通路介导的肝细胞凋亡.