引流淋巴结在肿瘤记忆CD8+T细胞形成中的作用

目的 探究引流淋巴结(tumor-draining lymph nodes,TDLN)在肿瘤记忆CD8+T细胞形成中的作用,明确新辅助PD-L1抗体治疗对抗肿瘤免疫记忆的影响.方法 建立小鼠CT26/MC38-OVA结直肠癌皮下移植瘤模型,采用新辅助PD-L1抗体治疗,荷瘤15 d后手术切除肿瘤和TDLN.手术30 d后运用肿瘤再挑战模型评估TDLN在新辅助PD-L1抗体治疗条件下对免疫记忆形成的影响.利用过继回输实验探究新辅助PD-L1对肿瘤特异性CD8+T细胞的影响,运用流式细胞术在术时(效应阶段)和术后30 d(记忆阶段)检测CD45.1+CD8+T细胞在各组织中的分布以及记忆表型变化.结果 新辅助PD-L1抗体治疗显著缩小手术时肿瘤大小(P＜0.05),肿瘤再挑战结果显示,接受新辅助PD-L抗体治疗,肿瘤生长显著减缓,而TDLN的切除导致肿瘤生长加剧(P＜0.05).但对肿瘤再挑战进行长期观察发现,无论是否接受新辅助PD-L1抗体治疗,肿瘤最终均消退.过继回输实验结果表明,TDLN及非引流淋巴结(no-draining lymph nodes,NLN)中贮存的CD45.1+CD8+T细胞数量最多(P＜0.05),且在记忆阶段,中枢记忆T细胞(Tcm)和组织驻留记忆T细胞(Trm)主要分布于TDLN及NLN(P＜0.05).新辅助PD-L1抗体治疗后,引流淋巴结及非引流淋巴结等组织中CD45.1+CD8+T细胞的分布和记忆表型没有明显变化.结论 TDLN是记忆CD8+T细胞的主要驻留场所,但新辅助PD-L1抗体治疗条件下,TDLN切除并不影响其长期抗肿瘤免疫能力.