大众化的基因组定点修饰技术——从TALEN到CRISPR/Cas系统

近年来,以锌指核酸酶(ZFN)和TALEN为代表的人工构建的序列特异性核酸内切酶为基因组定点修饰技术带来了革命性的飞跃,使原来只能在小鼠、果蝇等极少数物种中实现的基因打靶迅速扩展到多种实验材料。本实验室在斑马鱼中建立了一系列基于TALEN的基因组靶向修饰技术,可用于制备多种类型、可稳定遗传的突变体,例如在特定位点高效诱导indel突变、通过同源重组实现基因敲入,还能够利用两对TALEN进行染色体大片段的靶向删除或倒位,最大可达1 Mbp。最近,陆续在体外培养的人类细胞系以及斑马鱼、果蝇等一些模式生物中报道了一种更为简便的基因打靶技术。该技术利用了一种在细菌及古细菌中普遍存在的、称为CRISPR...