TALEN介导的MYH9基因沉默及对细胞周期与凋亡的影响

目的：利用TALEN技术敲除人胃癌细胞系MGC803细胞株MYH9基因，观察MYH9基因沉默后细胞周期及凋亡改变。方法根据斯丹赛FastTALETM TALEN试剂盒说明书，设计并构建靶向MYH9基因的TALEN质粒对。通过质粒转染、DNA测序、RT-PCR和Western blot等检测质粒活性，成功挑取MYH9基因敲低单克隆株，并对构建好的细胞株进行周期和凋亡检测。结果成功挑选的MGC803单克隆细胞株未检测到MYH9基因完全敲除；MYH9基因敲低后，MGC803细胞周期受阻于G2/M期（P<0.05），早期凋亡增加（P<0.05）。结论利用TALEN技术成功构建MGC803细胞MYH9基因敲低单克隆株，该模型有助于后期深入探讨胃癌MYH9基因功能。