Detección de la actividad de desoxiribonucleasa (DNasa) en cepas de Clostridium chauvoei Desoxiribonuclease activity detection in Clostridium chauvoei strains

La toxina beta de Clostridium chauvoei posee actividad de desoxiribonucleasa (DNasa) y se considera uno de sus principales factores de virulencia. Se detectó su producción a partir de cepas provenientes de aislamientos bovinos, empleando como controles C. chauvoei American Type Culture Collection (ATCC) 10092 y C. septicum y C. perfringens tipo A, ambos aislamientos de laboratorio. La actividad enzimática se evidenció sobre un sustrato sólido con el agregado de DNA y verificando macroscópicamente su degradación. Se desarrolló una metodología sencilla empleando agar comercial para ensayo de DNasa, con agregado de suero equino estéril. Cada cepa se sembró sobre la superficie del medio de cultivo, incubando en atmósfera anaerobia hasta 48 horas a 37 °C. Los cultivos se sometieron a la acción de ácido clorhídrico (HCl) 1N. La aparición de una zona clara y transparente alrededor y por debajo del desarrollo microbiano se consideró reacción positiva. La actividad enzimática se detectó en 10 de 12 cepas estudiadas y en los controles. El agregado de suero al medio base comercial permitió el desarrollo óptimo de los microorganismos evidenciando con claridad la zona de digestión enzimática.Beta toxin of C. chauvoei has desoxiribonuclease (DNase) activity which is regarded as one of its virulence factors. The production of DNase was detected in strains isolated from bovines, using as controls C. chauvoei ATCC 10092, and C. perfringens Type A and C. septicum, both laboratory isolates. The enzyme activity was made evident on a DNA substrate observing the macroscopic degradation. A simple methodology was developed using a commercial medium for DNase test, with the incorporation of sterile horse serum. Each strain was streaked on the surface of the medium, incubated in anaerobic atmosphere at 37 °C for 48 hours. The plates were revealed with HCl 1N. The appearance of a clear and transparent zone around and under the microbial growing was considered a positive reaction. Enzyme activity was detected in 10 of 12 strains and also in the controls. The serum addition to the commercial basal medium allows the optimum development of the microorganism showing the enzymatic digestion zone.